5、離子層析法
離子層析法精密度高、重復(fù)性好且操作簡單,被臨床廣泛采用。檢測原理由于血紅蛋白β-鏈N末端纈氨酸糖化后所帶電荷不同,在偏酸溶液中總糖化血紅蛋白(GHb)及HbA均具有陽離子的特性,因此經(jīng)過陽離子交換層析柱時可被偏酸的緩沖液平衡過的樹脂來吸附,但二者吸附率不同,GHb正電荷較少吸附率較低,HbA正電荷較多吸附率較高。
用不同pH的磷酸鹽緩沖液可以分次洗脫出GHb和HbA,用KCN可將Hb轉(zhuǎn)化為高鐵氰化血紅蛋白,用分光光度計測定?;蛘叩玫较鄳?yīng)的Hb層析譜,其橫坐標(biāo)是時間,縱坐標(biāo)是百分比。HbA1c值以百分率來表示?,F(xiàn)在大部分都用全自動測定儀測定。
6、等電點聚集法
是測定GHb的新技術(shù),它是在聚丙烯酞凝膠中加人載體兩性介質(zhì)的薄板上形成一個由陽極到陰極逐漸增加的pH梯度,溶血液中各個組份將移動到各自的等電點的pH位置上,這樣就得到比一般電泳法更好的分劃效果和比較集中的色帶,通過分辨率高的微量光密度儀掃描,可以準(zhǔn)確地測定出各自組份的含量。由于它能夠分辨出一級結(jié)構(gòu)不同的HbA、HbAc、HbF、HbS及HbC等,可完全避開各種物質(zhì)的干擾。
7、化學(xué)發(fā)光法
采用離子捕捉免疫分析法,應(yīng)用抗原抗體反應(yīng)原理,聯(lián)以熒光標(biāo)記物,通過連接帶負電的多陰離子復(fù)合物,吸附到帶正電的纖維表面,經(jīng)過一系列徹底清洗等步驟后,測定熒光強度變化率,計算濃度。采用專用試劑包和免疫發(fā)光分析儀,其檢測系統(tǒng)易于規(guī)范和重復(fù),可減少操作技術(shù)誤差,檢測的靈敏度和特異性高,批內(nèi)、批間變異系數(shù)小,回收率高,準(zhǔn)確度高,交叉污染率小,影響因素少。
8、酶法
原理為用特殊蛋白酶分解Hb,3~5min內(nèi)果糖基氨基酸從Hb分離,果糖基氨基酸氧化酶(FAOD)從果糖基氨基酸產(chǎn)生H2O2,H2O2經(jīng)POD與DA-64反應(yīng),選擇751nm測吸光度改變求得GHb濃度。
結(jié)語:通過上文的介紹,想必大家對于糖化血紅蛋白都是有了一個比較全面的了解了吧,那么大家知道糖化血紅蛋白是什么了吧,希望上面的文章能夠幫助到大家哦,祝大家有一個健康的身體,遠離疾病哦。